Депротеинирование
Из трех компонентов, составляющих кутикулу насекомых: хитин, белок и меланин, два последних хорошо растворимы в щелочных условиях. Таким образом, для выделения чистого хитина из кутикулы личинок восковой моли Galleria mellonella необходимо подобрать оптимальные условия одновременного щелочного гидролиза кутикулярных белков, а также меланиновых пигментов, связанных с белками.
Как правило, для депротеинирования панцирей ракообразных используются 1 - 5%-ные растворы NaOH, продолжительность процесса 1-6 ч. Такой способ позволяет снизить содержание белковых веществ в
панцире до 5% и менее [214].
С целью определения оптимальных условий депротеинирования, учитывая особенности сырья, нами были проведены эксперименты по щелочному гидролизу кутикулы личинок восковой моли в различных условиях и определены концентрационные, температурные и временные параметры процесса. Известно, что остаточные количества белка могут влиять не только на физико-химические, но и биологические свойства полимера, ухудшать дальнейшую переработку и ограничивать применение его производных.
Определение оптимальной концентрации щелочи
В данном эксперименте депротеинирование 10% суспензии кутикулы личинок восковой моли проводили при температуре 55-60°С в течение 2 ч при постоянном перемешивании с изменением концентрации щелочи от 0,25 до 20%. Данные о влиянии концентрации щелочи на выход ХМК и БМК из кутикулы личинок восковой моли представлены на рисунке 3.
Рис.З. Влияние концентрации щелочи на выход ХМК (1) и БМК (2) при депротеинировании
Из результатов, приведенных на рисунке 3, следует, что изменение концентрации NaOH от 0,25 до 3% способствовало увеличению
количества удаляемого БМК от 7 до 21%. Дальнейшее увеличение концентрации NaOH в 5-6 раз не приводило к более полному извлечению меланопротеинового комплекса, напротив, происходило к снижению его выхода на 15%. Последнее, возможно, объясняется частичным щелочным гидролизом самого белка в комплексе. Косвенным доказательством этого факта служило ухудшение осаждения белка при подкислении (рН
Еще по теме Депротеинирование:
- СОДЕРЖАНИЕ
- 1.4. Получение хитина и хитозана из насекомых
- Материалы и методы
- Депротеинирование
- Обесцвечивание
- Ферментативный гидролиз